和记怡情娱乐官网

您好!欢迎访问和记怡情娱乐官网(上海)生命科学有限公司网站!
全国服务咨询热线:

当前位置:首页 > 资料下载 > 乙酰胆碱转移酶(ChAT)测试盒说明书

乙酰胆碱转移酶(ChAT)测试盒说明书

发布时间:2023/3/5      点击次数:360

乙酰胆碱转移酶(ChAT)测试盒说明书

(测组织)

 

一、测定原理:

胆碱移酶(choline acetyltransferase    ChAT)定是乙酰A 碱为物,在 ChAT 的作用下,反应的生成物和显色剂结合,在 324nm 处测定吸光度,以此计算 ChAT 的活力。

二、试剂组成与配制(40 /20 )

试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃保存。室温低时会有结晶析出,测试前 37℃水浴至澄清。

试剂二:粉剂×1 支,临用前加 220μL 的蒸馏水,充分溶解;用不完的试剂-20℃以下保存。

试剂三:粉剂×1 支,临用时每支加双蒸水 440μL,用不完的试剂-20℃以下保存。

试剂四:液体×1 支,临用前每支用双蒸水 1:1 稀释,4℃保存。

试剂五:液体×1 支,4℃保存。

试剂六:液体×1 支,4℃保存。试剂七:液体×1 支,4℃保存。

三、操作步骤:

1、样本前处理:


10%匀浆液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=19 的比例,加入 9 倍体积的生理盐水,2500 /分,离心 10 分钟,取上清液,再用生理盐水 2 倍稀释后测定;

2、操作表:


测定管

对照管

试剂一(μL

105

105

试剂二(μL

5

5

试剂三(μL

10

10

试剂四(μL

10

10

试剂五(μL

10

10

试剂六 (μL)

10

10

混匀,37°C 水浴预温   5 分钟

5%的组织匀浆上清(μL

25

(煮沸的匀浆上清)25

混匀,37°C 水浴 20 分钟,100°C 沸水水浴 2 分钟终止反应

蒸馏水 (μL

425

425

混匀,4000   r/min×10min 离心后取上清进行显色反应

上清  μL

500

500

试剂七(μL

10

10

混匀,静置   15   分钟,在 324nm   处,用 1cm   光径,2mm   内径的石英比色皿,蒸馏

水调零,测定各管的吸光度值。



四、测定意义:

乙酰胆碱 Ach 是调节食道平滑肌运动的主要的兴奋性神经递质。食道平滑肌收缩主要是由于 Ach 释放引起。而乙酰胆碱转移酶(Choline acetyltransferase ChAT)和乙酰胆碱脂酶(Acetylcholinesterase ACHE)分别是

Ach 的合成酶和水解酶,调节 Ach 的代谢。食道组织中这两个酶的活力代表了食管内源性胆碱能神经功能状态。

乙酰胆碱是延髓脊髓运动神经元,自主神经系统神经节前纤维,神经节后胆碱能(副交感神经)纤维,以   及中枢神经系统内许多神经元(例如基底节,大脑运动区皮层)的主要神经递质。它是通过胆碱乙酰转移酶的   作用,由胆碱与来自线粒体的乙酰辅酶 A 所合成。在获得释放后,乙酰胆碱刺激特殊的胆碱能受体,这种相互作用很快被局部的胆碱酯酶所终止,后者使乙酰胆碱被水解为胆碱与乙酸盐。乙酰胆碱的水平由胆碱乙   酰转移酶和胆碱的摄取所调控。


文件下载    图片下载    
和记怡情娱乐官网(上海)生命科学有限公司
地址:金大公路8218号1幢
邮箱:
传真:
关注和记怡情娱乐官网
欢迎您关注和记怡情娱乐官网的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注和记怡情娱乐官网的微信公众号
了解更多信息
和记怡情娱乐官网 和记怡情娱乐官网 必威betway官网 必威betway官网 必威betway官网 必威betway官网 必威betway官网入口 必威betway官网入口