人鼻黏膜上皮细胞
产品名称 :人鼻黏膜上皮细胞
产品货号 :YLK-XB0515h
组织来源 :鼻黏膜组织
产品规格 :5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介:
该细胞分离自鼻黏膜组织;黏膜是覆盖在人体内消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔内壁的一层组织结构,由上皮组织和疏松结缔组织构成。根据部位不同,有口腔黏膜、胃肠黏膜、鼻腔黏膜、气管黏膜、阴道黏膜、眼睑黏膜等不同名称。
它们的结构也因功能、部位不一而不尽相同。鼻腔黏膜,简称鼻黏膜,覆盖于鼻腔表面,黏膜下方为软骨、骨或骨骼肌。根据结构与功能的不同,鼻黏膜又分为前庭部、呼吸部和嗅部三部分。
前庭部是邻近外鼻孔的部分,有丰富的鼻毛可以阻挡空气中较大的尘粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部,有发达的上皮纤毛,它们可向咽部摆动,黏着有尘粒、细菌的黏液排向咽部,最终将它们排出体外。
此外,此部分有丰富的血管与腺体,对吸入的空气有加温和湿润作用。嗅部黏膜范围较小,主要位于鼻腔顶部。它含有一种专司嗅觉的嗅细胞及嗅腺,它们分泌能溶解到达嗅区的含气味的微粒,刺激嗅细胞表面上的嗅毛产生嗅觉,而且还由于嗅细胞具有不同的受体,可分别接受不同化学分子的刺激,因此可产生不同的嗅觉。
质量检测
和记怡情娱乐官网生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 : 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 : 每2-3天换液一次
生长特性 : 贴壁
细胞形态 : 成纤维细胞样
传代特性 : 可传3-5代左右
传代比例 : 1:2
消 化 液 : 0. 25% 胰蛋白/酶
培养条件 : 气相 : 空气,95% 。C O2,5%
该细胞体外培养周期有限。建议使用和记怡情娱乐官网生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完培终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。
3) 经1000rpm离心5min丢弃上清,用5ml完培基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。
5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰/酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和和记怡情娱乐官网联系,详尽告知细胞的具体情况,以便和记怡情娱乐官网的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。