人前列腺上皮细胞
产品名称 :人前列腺上皮细胞
产品货号 :YLK-XB0528h
组织来源 :前列腺
产品规格 :5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介:
人前列腺上皮细胞分离自前列腺组织。前列腺(Prostate) 是雄性te有的性腺器官。前列腺是不成对的实质性器宫,由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过,扼守着尿道上口,所以,前列腺有问题时,排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的,具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。
作为外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是构成精液主要成分。作为内分泌腺,前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。前列腺上皮细胞与前列腺的功能关系密切,上皮细胞的损伤是前列腺炎的主要病症,重度的前列腺炎患者的前列腺液内可检测到脱落的上皮细胞,这是上皮细胞损伤的标志。炎症发生时,与炎症相关的一些炎症因子可能发生变化。因此,体外培养前列腺上皮细胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基础。
细胞特性
1) 细胞来源于人正常前列腺组织。
2) 细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
质量检测
和记怡情娱乐官网生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
包被条件 :鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :上皮细胞样
传代特性 :可传2-3代
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
该细胞体外培养周期有限。建议使用和记怡情娱乐官网生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完培终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。
3) 经1000rpm离心5min丢弃上清,用5ml完培基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。
5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰/酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和和记怡情娱乐官网联系,详尽告知细胞的具体情况,以便和记怡情娱乐官网的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。