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人脑微血管内皮细胞

简要描述:人脑微血管内皮细胞分离自脑组织。脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分,它是组成脑微血管腔面单层扁平上皮样细胞,能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑,大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。

  • 更新时间:2024-07-09
  • 厂商性质:生产厂家
  • 生产地址:上海
  • 访  问  量:151

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详细介绍

品牌ATCC货号YLK-XB0618h
规格5*10^5供货周期现货
主要用途科研应用领域化工,生物产业
组织来源脑组织

人脑微血管内皮细胞

产品名称 :人脑微血管内皮细胞

产品货号 :YLK-XB0618h

组织来源 : 脑组织

产品规格 :5×105cells/T25细胞培养瓶


细胞简介:

脑微血管内皮细胞分离自脑组织。脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分,它是组成脑微血管腔面单层扁平上皮样细胞,能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑,大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在脑血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。与外周内皮细胞相同,大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子,调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性,内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。


其主要特征如下
① 脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接,产生很高的跨内皮阻抗,延迟细胞旁的通量。
② 脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构,其液相物质胞饮水平较低。
③ 脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统,从而产生“两极分化"的表现型。


质量检测

和记怡情娱乐官网生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息

包被条件 :PLL(0. 1m g/ml) ,明胶(0. 1%)
培 养  基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :内皮细胞样
传代特性 :可传2-3代
传代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完培终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。
3) 经1000rpm离心5min丢弃上清,用5ml完培基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。
5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰/酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和和记怡情娱乐官网联系,详尽告知细胞的具体情况,以便和记怡情娱乐官网的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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