简要描述:A375+EGFP 人恶性黑色素瘤细胞A375源自一位54岁女性,是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在免疫抑制小鼠上成瘤,在琼脂上形成克隆。A375-EGFP是在 A375细胞上用慢病毒标记上EGFP,可以显示绿色荧光,带有嘌呤霉素抗性。
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品牌 | ATCC | 货号 | YLK-XB1645h |
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规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | YLK-XB1646h |
A375+EGFP 人恶性黑色素瘤细胞
细胞特性:
1) 来源:人黑色素瘤
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5)用途:仅供科研使用。
运输和保存:
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与和记怡情娱乐官网联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的注意事项:
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系和记怡情娱乐官网。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完培6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完培来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM基础培养基 87 %,
优质胎牛血清 10 %
GlutaMAX-1谷氨/酰胺 1%
Sodium Pyruvate丙酮酸钠 1%
P/S青霉/素-链霉/素 1%
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完培的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完培重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完培的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
A375+EGFP 人恶性黑色素瘤细胞
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