人乳头瘤病毒16（HPV-16）PCR试剂盒

产品名称：人乳头瘤病毒16（HPV-16）PCR试剂盒

英文名称：Human Papillomavirus 16 (HPV-16) PCR Kit

人乳头瘤病毒是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒 A 属，是球形DNA病毒，能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。表现为寻常疣、生殖器疣（尖锐湿疣）等症状。 随着性病中尖锐湿疣的发病率急速上升和宫颈癌、肛men癌等的增多，人乳头瘤病毒（hpv）感染越来越引起人们的关注。HPV16 是高危型病毒，有宫颈癌倾向，是癌前病变。因此快速检测人乳头瘤病毒 16 具有重要意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒，它具有下列特点：

1.    即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。

2.    引物经过精心优化，专一性强，只扩增人乳头瘤病毒 16 ，与其他病原没有交叉反应。

3.    提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4.    PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5.    本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

【试剂组成】

【自备试剂】样品RNA。

【注意事项】

一、样品 DNA 的制备

1.    用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸/提取试剂盒兼容。

2.    如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 人乳头瘤病毒16 PCR 阳性对照而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。

二、设置 PCR 反应（20μL 体系）

3.    对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个PCR 管中分别加入下列成分

4.    按下表设置 PCR 反应：

三、电泳检测

5.    取 5-10 μL 扩增产物就行常规琼脂糖电泳，检测扩增效果，由于扩增产物较短，建议用1.5%-2.0%的琼脂糖凝胶。

6.    阳性样品预期得到的扩增产物长度为200bp左右。如果两个阴性对照有此扩增产物，说明环境污染，则整个实验无效，不需要分析实验结果。

7.    如果所有样品和PCR阳性对照均无此扩增产物，则说明有系统性的问题（试剂、设备、程序、操作等），需要重复并排查原因。

8.    如果没有上述两种情况，则实验有效，可以分析样品的扩增结果。N+2个样品中有扩增产物的判定为阳性，无则判定为阴性。